牛奶是最(zuì)古老的天然飲料(liào)之一,被譽為“白色血液”,對人體的重要性可想而(ér)知(zhī)。而組成(chéng)人體蛋白質的氨基酸有20種(zhǒng),其中有8種是人體本身(shēn)不(bú)能合成的(嬰兒為(wéi)9種,比(bǐ)成人多的是(shì)組(zǔ)氨酸(suān)),這些氨基(jī)酸稱為必需氨基酸。我們進食的蛋白質中(zhōng)如果包(bāo)含了所有的必需氨基酸,這種(zhǒng)蛋白質便叫(jiào)作全蛋白(bái)。牛奶中的蛋白質便是全蛋白。
今天(tiān),我們通過實驗介紹純牛奶及酸奶的(de)蛋白質測定方法(fǎ)。
1.實驗部(bù)分
1.1儀器
N310自動凱氏定氮儀(格丹納)
DS-360-42H高溫石墨消解儀(格丹納)
1.2試劑與耗材 鹽(yán)酸或硫酸溶液:c(H + )= 0 . 1mol /L ,標準滴定液。
硼酸(suān)溶液:質量分數 2% 。
氫氧化鈉溶液:質量分數 40% 。
溴甲酚綠 - 甲基紅混合指示劑:將溴甲酚綠乙醇溶液 (1g/ L) 與甲基紅乙醇溶液(yè)(1g/ L) 按 5 : 1 體積比臨時混合搖勻(yún)備用。
實驗中涉(shè)及到的試劑,均為優級純或分析純;
實驗(yàn)用水為無氨蒸餾水。
催化劑片: 3g 硫酸鉀和 0. 2g 硫酸銅混合(hé)均勻壓片
1.3實驗過程
1.3.1取樣 準確稱量2-3g 的樣品(精確至0.1mg ),加催化(huà)劑一(yī)片(或硫(liú)酸鉀5g 與(yǔ)硫酸(suān)銅0.5g) ,再沿瓶壁滴加硫酸 8.5mL。
1.3.2石墨(mò)消解 利用DS-360-42H高溫石墨消解儀(yí)進行消解,將消解管放在石墨爐上,蓋上排(pái)氣罩,連接廢氣吸(xī)收係統,設定消解溫度參數如下表:
消解完,取(qǔ)下消解管並冷卻。
1.3.3上機測試 待消解管內溶液冷卻至室溫後,將消解管放(fàng)置於N310自動(dòng)凱氏定氮儀上,開始蒸餾滴定。定氮儀設置程序(xù)如下:
1.3.4儀器自(zì)動滴定並給出計算(suàn)結果。
2.結果與討論
采用多孔石墨(mò)消解儀可以快速大批量對樣(yàng)品進行消解,比電熱板消(xiāo)解速度跟效率都要大大提高,回收率也得到保障,使用凱氏定氮儀測試(shì)奶製品中蛋白質含量,結果準確,平行性良好。